Page 644 - SESİM LABORATUVAR MARKET

TEKNİK BİLGİLER

Plastik Malzemelerden RNase ve DNase Uzaklaştırma

RNA ve DNA zincirini kıran enzimler olan RNase ve DNase nükleotid araştırmalarında olumsuz etkilere neden olabilirler. DNase
121 °C’de 15 dk otoklavlama ile ortadan kaldırılabilir ya da aşağıda verilen adımlar uygulanabilir. Doğru uygulama için malzemenin
üretildiği plastik tipi ile aşağıdaki tabloda verilen uygulama adımlarını karşılaştırın.

1. Isıtma: 180 °C’de en az 8 saat
2. Durulama: Kloroformda
3. Islatma: 37 °C’de 2 saat boyunca %0.1 dietil pirokarbonat (DEPC) sulu çözeltisi ile; birkaç defa steril su ile durulama (DEPC-
eklenmiş) , 100 °C’ye 15 dk boyunca ısıt veya 121 °C’de 15 dk otoklavla (yavaş sterilizasyon döngüsü kullanılmalıdır). Isıtma veya
1,2
otoklavlama DEPC kalıntılarını uzaklaştırır.
4. Temizlik: Malzemeyi deterjan çözeltisi ile temizle, su ile doğrudan durula ve kuruması için %95 etanol ile durula. Malzemeyi %3
hidrojen peroksit (H O ) ile oda sıcaklığında 10 dk boyunca ıslat. Malzemeyi doğrudan DEPC eklenmiş suyla durula. 1,2
2
2
5. Islatma: Bir gece boyunca malzemeyi %0.1 EDTA’lı 0.1 N Sodyum Hidroksit sulu çözeltisi içerisinde DEPC eklenmiş suyla doğrudan
durula. 1,2

RNase ve DNase Uzaklaştırma Tablosu
Materyal 1 (Isıtma) 2 (Durulama) 3 (Islatma) 4 (Temizlik) 5 (Islatma) Açıklamalar
ETFE X X X X X
FEP X X X X
HDPE X* X X X 100 °C’ye 20 dk boyunca
LDPE X* X X X 70 °C’ye 120 dk boyunca
PC X¥ X¥
PETG X X X 60 °C’ye bir gece boyunca
PFA X X X X X
PP/PPCo X* X X X
PMP X* X X X
TPE X X X

* Sadece durula, uzun süreli temas yok
¥ Kimyasal bozulmayı engellemek için bol miktarda durula
1 Dikkat: DEPC şüpheli bir karsinojen maddedir ve dikkatle kullanılmalıdır. DEPC çözeltileri göz, mukoza dokusu ve ciltte iritasyona
neden olur.
2 DEPC eklenmiş su: Suya % 0.1 DEPC ekle ve oda sıcaklığında en az 12 saat beklet. Daha sonra suyu 100 °C’ye 15 dk boyunca ısıt
veya 121 °C’de 15 dk otoklavla.

646 www.mikrobiyoloji.org